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Methodenspektrum

Immunologische Methoden:

- Vielfarben-Durchflusszytometrie (membranständig, intrazellulär)

- funktionelle Durchflusszytometrie: 

       ·  Zellproliferation

       ·  Apoptose

       ·  Zellzyklusanalyse

       ·  Tetramerfärbungen

       ·  Membranpotential-Bestimmungen

       ·  Ca-Influx

- Zellseparierung:

       ·  magnetische Zellsortierung (MACS, CD8, CD4, etc.)

       ·  Sortierung mittels Cell Sorter (GFP, einzelne und Kombinationen von CD-Markern,                   Seitenpopulation von Stammzellen)

- ELISA/Luminex-Analysen

- Elispot-Analysen

- Zytoxizitätsassays

- Isolierung und Reifung von dendritischen Zellen (DC)

- funktionelle Analysen von Effektorzellen und immunsuppressiven Zellen

- multispektrales Imaging / IHC (z.Z. Etablierung mit dem Institut für Pathologie, Halle)

 

Molekularbiologische und proteinchemische Methoden:

- DNA, RNA- und Proteinisolierung

Quantitative und semi-quantitative PCR

- Methylierungsstatus (hochauflösende Schmelzkurvenanalyse (HRM), Methylierungs-              spezifische PCR, kombinierte Restriktionsanalyse (COBRA), Bilsufidsequenzierung)

- molekularbiologische Quantifizierung des FoxP3 Locus-spezifischen                Methylierungsstatus von Treg

- Klonierungen/Einführung zielgerichteter Mutationen

- Gentransfer in humane und murine (Tumor-)Zellen

- microRNA Studien (miTRAP)

- Western Blot-Analysen

- Immunpräzipitation 

- Chromatinimmunpäzipitation

- Promotoranalysen

- Proteomanalyse:

           ·  zweidimensionale (2D)-Gelelektrophorese

           ·  2D-Differenzgelelektrophorese (minimale, saturierende Markierung)

           ·  PROTEOMEX

           ·  Subproteomanalyse (z.B. Redox-, Phospho-, Membran-)

           ·  Massenspektrometrie (TOF-MS)

 

Zellbiologische Methoden:

- Wachstum:

           ·  Zellproliferation

           ·  Migration

           ·  Invasion

           ·  Verankerungs-unabhängiges Wachstum

           ·  Apoptose

           ·  Wundheilung

           ·  Unterschiedliche Enzymassays (Lactat, Glutathion, Matrix-Metalloproteinasen)

           ·  Immunfluoreszenz (Lokalisierung, Expressionsanalyse, Mitochondrienpotential)

 

- Zellkulturen:

           ·  T-Zellkulturen (inklusive regulatorische T-Zellen (Tregs))

           ·  NK-Zellkulturen

           ·  NK-T-Zellkulturen

           ·  DC-Kulturen (± Differenzierung)

           ·  myeloide Suppressorzellen

           ·  Etablierung von Tumorzelllinien

           ·  Kultivierung von murinen und humanen Tumorzellen

           ·  Isolierung von Tumor(stamm)zellen

           ·  Kultivierung mesenchymaler Stammzellen (± Differenzierung)